河南专业科研细胞实验技术服务tunel检测实验-效胜实业
发布时间:2020年04月21日
详细说明
河南专业科研细胞实验技术服务tunel检测实验-效胜实业
效胜实业河南专业科研细胞实验技术服务tunel检测实验
本公司开展了石蜡包埋、石蜡切片、冰冻切片、HE染色,massson染色,PAS染色等染色,免疫组化,免疫荧光,WB .PCR.透射电镜,扫描电镜,细胞培养等实验服务;UNEL检测的原理:
细胞在发生凋亡时,会激活一些DNA内切酶,这些内切酶会切断核小体间的基因组DNA。细胞凋亡时抽提DNA进行电泳检测,可以发现180-200bp的DNA ladder。基因组DNA断裂时,暴露的3’-OH可以在末端脱氧核苷酸转移酶(Terminal Deoxynucleotidyl Transferase, TdT) 的催化下加上荧光素 (FITC) 标记的dUTP (fluorescein-dUTP) ,从而可以通过荧光显微镜或流式细胞仪进行检测,这就是TUNEL (TdT-mediated dUTP Nick-End Labeling) 法检测细胞凋亡的原理。
TUNEL检测(石蜡切片)
取下适当的新鲜的组织块固定于4%-10%浓度的多聚甲醛或中性甲醛中,甲醛与组织块体积比在10:1和20:1之间,4摄氏度保存运输;
TUNEL检测(冰冻切片)
取下的新鲜组织应立即放入超低温冰箱或者液氮中,用干冰运输,固定好的切片应于-80或者-20度保存,并尽快用于检测;
TUNEL检测(细胞爬片)
细胞爬片4%多聚甲醛4度固定30min,换PBS缓冲液4度保存运输,尽快用于检测;
荧光法需要先拍一张凋亡荧光图,再拍一张原位染核图,再合并图层,最终我们提供的为三张荧光图片。