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河南专业科研细胞实验技术EMSA实验实验-效胜实业


效胜实业河南专业科研细胞实验技术服务EMSA实验实验
本公司开展了石蜡包埋、石蜡切片、冰冻切片、HE染色，massson染色，PAS染色等染色，免疫组化，免疫荧光，WB .PCR.透射电镜，扫描电镜，细胞培养等实验服务；EMSA:凝胶迁移或电泳迁移率检测是一种检测蛋白质和DNA序列相结合的技术，最初用于研究DNA结合蛋白和其相关的DNA结合序列相互作用，可用于定性和定量分析。分为2种类型：同位素标记探针，非同位素标记探针。

通常将纯化的蛋白和细胞粗提液和32P同位素标记的DNA或RNA探针一同保温，在非变性的聚丙烯凝胶电泳上，分离复合物和非结合的探针。DNA-复合物或RNA-复合物比非结合的探针移动得慢。同位素标记的探针依研究的结合蛋白的不同，可是双链或者是单链。当检测如转录调控因子一类的DNA结合蛋白，可用纯化蛋白，部分纯化蛋白，或核细胞抽提液。在检测RNA结合蛋白时，依据目的RNA结合蛋白的位置，可用纯化或部分纯化的蛋白，也可用核或胞质细胞抽提液。竞争实验中采用含蛋白结合序列的DNA或RNA片段和寡核苷酸片段（特异），和其它非相关的片段（非特异），来确定DNA或RNA结合蛋白的特异性。在竞争的特异和非特异片段的存在下，依据复合物的特点和强度来确定特异结合。

实验步骤：探针的标记，探针的纯化，EMSA胶的配制，EMSA的结合反应，探针冷竞争反应，突变探针冷竞争，super-shift 反应，电泳。