公司名称：青岛西凯生物技术有限公司

脂肪干细胞向神经前体细胞分化的实验方案一：实验目的

青岛西凯生物技术有限公司于2010年，是一家以干细胞，免疫细胞为核心，结合jing准医疗，致力于“家族生命健康管理”，专注于“干细胞的研发储存及应用”，设有再生医学zhong心、综合性干细胞库、西凯生物干细胞抗衰美容临床研究转化基地和培训zhong心。

1、诱导脂肪干细胞定向分化为神经前体细胞。

2、流式检测CD49d，nestin表达量，确定诱导方法。

3、动物：健康成年SD大鼠20只，190-220g，SPF级，雌雄各半。分两组：一组4只注射生理盐水，是为空白对照，一组12只尾部静脉注射，为供试品组，一组4只尾部静脉注射脂肪干细胞，为阳性对照组。连续饲养30天，观察诱导获得的神经前体细胞对大鼠是否有毒副作用。

4、15天每组取2只，以Elisa法检测血清中bFGF的含量。30天时再取剩余动物，以相同方法检测。

细胞分组：

分组诱导剂（ng/ml）

组别1 DMEM/F12+10%FBS+3mmol/Lβ-ME+20g/LDMSO+200mmol/L BHA

组别2 DMEM/F12+10%FBS+20ng/mlEGF+20ng/mbFGF

组别3 DMEM/F12+10%FBS+20ng/mlEGF+20ng/ml bFGF+100ng/ml NGF

组别4 DMEM/F12+10%FBS+20ng/mlEGF+20ng/mlbFGF+100ng/mlNGF+200ng/ml GM1

空白对照完全培养基90%DMEM+10%FBS+100U抗sheng素