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科研试剂 美国Biostone多物种布鲁氏菌(布病)抗体(cELISA)
发布时间:2021年01月06日
详细说明
一、概述
试剂盒用于检测猪牛羊血清和牛奶中流产型布氏杆菌,马耳他布鲁氏菌,绵羊附睾种布鲁氏菌和猪种布鲁氏菌的抗体。试剂盒原理是基于cELISA方法,酶标板上已经包被纯化的布鲁氏菌抗原,样品和酶标抗体加入后,如果样品含有布鲁氏菌抗体,能与板上包被抗原特异性结合形成抗原抗体复合物,并阻断的酶标抗体与板上包被抗原结合。能结合在板上的酶标抗体的酶再催化底物显色,显色深度与样品中的抗体含量成反比关系。
二、试剂盒规格及组分
【试剂盒组分】 【10043-02】【10043-05】【储存温度】
【抗原包被板 Brucella antigen-Coated Plate】【2*96】【5*96】【4°C】
【阳性对照(红盖) Brucella Positive Control】【1.8mL】【2*1.8mL】【4°C】
【阴性对照(白盖)Brucella Negative Control】【1.8mL】【2*1.8mL 】【4°C】
【酶标抗体Anti-Brucella Antibody-HRP Conjugate】【1瓶】【2瓶】【4°C】
【10X稀释液10X Diluent Solution 】 【12mL】【28mL】【4°C】
【20X洗板液 20X Wash Solution】 【56mL】【120mL】【4°C】
【TMB底物 TMB Substrate】 【24mL】【58mL】【4°C】
【终止液 Stop Solution】 【24mL】【58mL】【4°C】
备注:如果试剂盒超过一个月不使用建议阴阳性对照和酶标抗体在-20°C储存。
三、试剂以及样品制备
1X稀释液:用9体积的蒸馏水稀释1体积的10X稀释液,得到1X稀释液。
1X洗板液:用19体积的蒸馏水稀释1体积的20X洗板液,得到1X洗板液。
酶标物(冻干粉):先加160ul 1X的稀释液溶解为100X的浓缩液,然后再用1X的稀释液按照检测用量稀释100倍后使用,例如60ul 100x的浓缩液:5940ul 1x的稀释液混匀后足够1板试剂盒的用量。备注:复溶后的100x酶标物保存于2-8°C的有效期为三个月,保存于-20°C的有效期为一年。
小反刍动物血清(山羊,绵羊)预稀释:在血清稀释板上使用1X稀释液将样品血清稀释5倍,例如将40uL的血清加入到160uL的1X稀释液中混匀,备用。
牛或者猪血清预稀释:在血清稀释板上使用1X稀释液将样品血清稀释10倍,例如将20uL的血清加入到180uL的1X稀释液中混匀,备用。
牛奶样品:在血清稀释板上使用1X稀释液将样品血清稀释2倍,例如将100uL的牛奶加入到100uL的1X稀释液中混匀,备用。
四、实验操作
【试剂】 【每孔用量】
【样品/对照】 【50uL】
【酶标抗体】 【50uL】
【1X洗板液】 【2mL】
【底物】 【100uL】
【终止液】 【100uL】
1.实验前1小时将试剂盒从冰箱中取出回复室温;
2.设置好对照