生物缓冲液TRIS(CAS77-86-1)的简介及应用
发布时间:05月13日
详细说明
Tris全称三羟甲基氨基甲烷,别称氨基丁三醇,CAS号为77-86-1。是一种白色结晶或粉末。溶于乙醇和水,微溶于乙酸乙酯、苯,不溶于乙醚、四氯化碳,对铜、铝有腐蚀作用,有刺激性的化学物质。
三羟甲基氨基甲烷广泛应用于急性代谢性及呼吸性酸血症,是一种碱性缓冲剂,对代谢酸中毒和酶活动反应具有良好的缓冲作用,可引起低血糖、低血压、恶心、呕吐,亦可抑制呼吸,甚至使呼吸停止。过量摄入或肾功能不全时可引起碱血症。作为生物缓冲剂和酸量 滴定法基准物质使用时,纯度要求较高,一般为99.9%-100.1%。
Tris(三羟甲基氨基甲烷)常用作生物缓冲液,常配成pH值为6.8,7.4,8.0,8.8。其结构式,pH值随温度变化很大。一般温度每升高一度,PH值下降0.03。Tris(三羟甲基氨基甲烷)被广泛应用于生物化学和分子生物学实验中的缓冲液的制备。在生物化学实验中常用的TAE和TBE缓冲液(用于核酸的溶解)都需要用到Tris。由于它含有氨基因此可以与醛发生缩合反应。
Tris(三羟甲基氨基甲烷)为弱碱,在室温25℃下,它的pKa为8.1;根据缓冲理论,Tris缓冲液的有效缓冲范围在pH7.0到9.2之间。Tris碱的水溶液pH在10.5左右,一般加入盐酸以调节pH值至所需值,即可获得该pH值的缓冲液。但同时应注意温度对于Tris的pKa的影响。由于Tris缓冲液为弱碱性溶液,DNA在这样的溶液中会被去质子化,从而提高其溶解性。人们常常在Tris盐酸缓冲液中加入EDTA制成“TE缓冲液”,TE缓冲液被用于DNA的稳定和储存。如果将调节pH值的酸溶液换成乙酸,则获得“TAE缓冲液”(Tris/Acetate/EDTA),而换成硼酸则获得“TBE缓冲液”(Tris/Borate/EDTA)。这两种缓冲液通常用于核酸电泳实验中。由Tris配成的TAE,TBE等是DNA电泳最常用的试剂,TE(pH8.0)主要用于溶解DNA。(TE为Tris加EDTA合称。)1MTris-HCl6.8和1.5MTris-HCl8.8是SDS-PAGE最常用的试剂。
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